Лабораторная работа 1. Обмен липидов

Опыт 1. Переваривание жиров. Воздействие желчных кислот на активность панкреатической липазы.

Расщепление жиров в кишечном тракте на глицерин и высшие жирные кислоты происходит приемущественно при участии липазы поджелудочной железы. Триглицериды распадаются на глицерин и жирные кислоты. Жирные кислоты можно найти титрованием щелочью. Желчные кислоты эмульгируют жиры, увеличивая их поверхность соприкосновения Лабораторная работа 1. Обмен липидов с липазой, также активируют липазу.

В колбочку наливают 20 мл молока и нейтрализуют, приливая 2 капли раствора фенолфталеина и 4 капли 10% раствора гидроксида натрия, а потом – по каплям 0,1 н. раствор гидроксида натрия до слабо-розовой расцветки. Из нейтрализованного молока готовят бывалые пробы согласно таблице. В качестве источника липазы употребляют продукт панкреатин. Пробы оставляют при Лабораторная работа 1. Обмен липидов комнатной температуре.

№ пробы V молока, мл m панкреатина, мг V желчи, мл V воды, мл Результаты титрования (в мл) 0,1 н. веществом NaOH через t, мин:
-
-
- -

Через данные промежутки времени от начала инкубации пробы титруют 0,1 н. веществом NaOH до слабо-розовой расцветки, после этого вновь оставляют при комнатной температуре. Количество Лабораторная работа 1. Обмен липидов израсходованной щелочи фиксируют в таблице. Всякий раз оттитровывается то количество жирных кислот, которое освобождается из жира молока при его гидролизе липазой за данный отрезок времени (15 минут).

Напишите уравнение расщепления триглицерида липазой. Изобразите графически динамику расщепления жира липазой для каждой пробы, откладывая на оси абсцисс время в минутках, а Лабораторная работа 1. Обмен липидов на оси ординат - количество 0,1 н. раствора NaOH (в мл), израсходованного на нейтрализацию жирных кислот, образовавшихся за данное время. Выразите активность липазы как концентрацию карбоксильных групп жирных кислот, образовавшихся в 100 мл молока за всегда исследования, пользуясь последующей формулой:

,

где С - концентрация СООН-групп, образующихся в 100 мл молока (г/100 мл); 0,1 - нормальность Лабораторная работа 1. Обмен липидов раствора NaOH; V- объем 0,1 н. раствора NaOH, израсходованный на титрование 5 мл молока за всегда инкубации (сумма всех титрований), мл; 5 - объем молока в титруемой пробе, мл. На основании хода кривых на графике и приобретенных данных концентрации карбоксильных групп придите к выводу о зависимости активности липазы от присутствия желчных кислот.

Опыт Лабораторная работа 1. Обмен липидов 2. Количественное определение общего холестерина в сыворотке крови прямым способом по реакции Златкис – Зака.Способ основан на реакции холестерина с уксусной и серной кислотами в присутствии хлорида железа. Возможно, происходит дегидратация холестерина и его окисление.

К 0,1 мл сыворотки крови добавляют 3 мл ледяной уксусной кислоты и 2 мл рабочего раствора хлорида железа Лабораторная работа 1. Обмен липидов, перемешивают. Готовят контроль: к 0,1 мл дистиллированной воды добавляют 3 мл ледяной уксусной кислоты и 2 мл рабочего раствора хлорида железа. Оставляют на 15 минут. Колориметрируют против контроля на фотоэлектроколориметре при длине волны 510-560 нм (зеленоватый светофильтр) в кювете с шириной слоя 1 см. Из стандартного раствора холестерина готовят разведения, как обозначено в таблице.

№ пробирок Стандартный Лабораторная работа 1. Обмен липидов раствор холестерина, мл Ледяная уксусная кислота, мл Рабочий раствор хлорида железа, мл Содержание холестерина в пробе, мг%
0,1 3,0 2,0
0,2 3,0 2,0
0,3 3,0 2,0
0,4 3,0 2,0
0,5 3,0 2,0

Через 20 минут пробы фотометрируют против контроля. По результатам строят калибровочный график. По калибровочному графику определяют содержание холестерина в сыворотке крови. Норма содержания холестерина в сыворотке крови – 120-250 мг% (3,12-6,50 ммоль/л).

Контрольные вопросы

1. Клинические Лабораторная работа 1. Обмен липидов симптомы стеатореи, характеризующейся излишком липидов в кале, обоснованы в большинстве случаев 2 причинами: а) недостаточной секрецией желчных кислот; б) отсутствием секрета поджелудочной железы. Почему эти предпосылки приводят к возникновению липидов в кале?

2. Растолкуйте, почему у пациентов со сниженной секрецией бикарбонатов поджелудочной железой даже при обычной секреции липазы и колипазы развивается стеаторея?

3. Почему Лабораторная работа 1. Обмен липидов почаще встречается гиперхолестеролемия, а не гипохолестеролемия?

4. Как поменяется синтез холестерина при питании только пищей из растений? Почему?

5. Укажите, в каких органах происходит синтез холестерина «на экспорт».

6. В чем различие функций фосфолипидов и триацилглицеролов?


labaratornaya-rabota-4-referat.html
labilnij-tip-a-e-lichko.html
labirint-dva-ostaetsya-odno-proizvol-stranica-10.html